标准曲线制作: 在各试管中分别加入0.1%葡萄糖标准液0,0.5,1,1.5,2.0,2.5,3.0毫升,每管各含葡萄糖各为0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0毫克,分别在各管中各加入2
向标准曲线的纵坐标,绘制出各浓度对应的光密度值。这样就可以得到一个标准曲线,用于后续实验中对未知样品中葡萄糖含量的测定。
具体操作步骤如下:
1. 准备试剂和仪器:0.1%葡萄糖标准液、斐林试剂、比色皿、分光光度计、沸水浴、冷水、离心机等。
2. 取7支试管,分别加入0.1%葡萄糖标准液0、0.5、1、1.5、2.0、2.5、3.0毫升,每管各含葡萄糖各为0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0毫克。
3. 在各试管中加入2毫升斐林试剂,混匀后,在试管口用玻璃球盖好。
4. 将装有试剂的试管放入沸水浴中加热15分钟,取出后在流水中冷却至室温。
5. 将冷却后的试管放入离心机中,以1500转/分离心5分钟,取出上清液。
6. 用分光光度计在590毫微米波长处对上清液进行比色测定,蒸馏水作比色时的对照。读取不同浓度的糖的各管的光密度值和空管的光密度值。
7. 计算各浓度对应的光密度值与空管光密度值之差,以此值作为纵坐标绘制标准曲线。
8. 使用标准曲线进行未知样品中葡萄糖含量的测定时,取待测样品溶液适量,加入到已知浓度的标准品中,使其浓度达到所需检测范围,然后按照上述方法进行比色测定,根据标准曲线得到待测样品中葡萄糖的含量。
具体操作步骤如下:
1. 准备试剂和仪器:0.1%葡萄糖标准液、斐林试剂、比色皿、分光光度计、沸水浴、冷水、离心机等。
2. 取7支试管,分别加入0.1%葡萄糖标准液0、0.5、1、1.5、2.0、2.5、3.0毫升,每管各含葡萄糖各为0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0毫克。
3. 在各试管中加入2毫升斐林试剂,混匀后,在试管口用玻璃球盖好。
4. 将装有试剂的试管放入沸水浴中加热15分钟,取出后在流水中冷却至室温。
5. 将冷却后的试管放入离心机中,以1500转/分离心5分钟,取出上清液。
6. 用分光光度计在590毫微米波长处对上清液进行比色测定,蒸馏水作比色时的对照。读取不同浓度的糖的各管的光密度值和空管的光密度值。
7. 计算各浓度对应的光密度值与空管光密度值之差,以此值作为纵坐标绘制标准曲线。
8. 使用标准曲线进行未知样品中葡萄糖含量的测定时,取待测样品溶液适量,加入到已知浓度的标准品中,使其浓度达到所需检测范围,然后按照上述方法进行比色测定,根据标准曲线得到待测样品中葡萄糖的含量。
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